食品整治辦[2009]29號 各省、自治區、直轄市及新疆生產建設兵團打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治領導小組： 　　根據《全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治方案》（衛監督發[2008]60號）規定和《全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治近期工作重點及要求》（衛監督發[2009]21號），全國專項整治領導小組組織制定了專項整治抽檢工作指導原則和專項整治國家專項抽檢工作方案，經專項整治領導小組各成員部門同意，現印發給你們，請認真組織實施。有關要求如下： 　　一、各省（市、區）專項整治領導小組要根據抽檢工作指導原則的要求，結合本地區的實際情況，制定具體的抽檢計劃并組織實施。請各地專項整治領導小組負責，務必于4月15日前將抽檢結果及分析評估報告報送全國專項整治領導小組辦公室。 　　二、承擔專項整治國家專項抽檢方案工作任務的各部門和檢驗機構要加強協調配合，按要求采樣并將樣品送至指定檢驗機構進行檢驗。檢驗機構要按時限完成樣品檢驗工作并將檢驗結果通報監督抽樣單位。 　　三、對抽檢中發現的違法食品生產經營行為，各地要依法予以查處，并將處理情況及時向社會公布。 　　抽檢中發現的問題，請及時函報我辦。 　　聯 系 人：李業鵬 　　聯系電話：010-87776913 傳真：010-67711813 　　附件：1.全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治抽檢工作指導原則 　　2.全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治國家專項抽檢工作方案 　　3.抽檢檢驗方法 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　全國打擊違法添加非食用物質 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　和濫用食品添加劑專項整治 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　領 導 小 組 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（代 章） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　二○○九年三月二十三日 （信息公開形式：主動公開） 　　附件1 全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治抽檢工作指導原則 　　為做好全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治（以下簡稱專項整治）抽檢工作，特制定本指導原則。 　　一、職責分工 　　各省專項整治領導小組負責組織各有關部門制定具體的抽檢計劃，落實各項工作任務，按時報送抽檢計劃和抽檢工作總結報告。 　　各部門要加強對各地本系統抽檢工作的督導檢查和指導，及時組織培訓和質量控制。 　　二、重點食品 　　乳及乳制品、米面制品、淀粉制品、豆谷制品、肉與肉制品、酒類、水產品、調味品。 　　三、抽檢要求 　　（一）重點抽檢項目。重點抽檢項目為衛生部等九部門公布的違法添加到食品中的非食用物質及易濫用的食品添加劑的名單（第一、二批）或在食品安全監督、監測和舉報投訴等渠道發現的非法食品添加物和濫用食品添加劑。 　　（二）樣品采集的要求。 　　1、樣品采集原則為樣品應具有代表性。應采集不同生產廠家的樣品，達不到要求數量的，可以采集同一廠家但不同品牌的產品，仍達不到的可以選擇不同口味的產品。 　　2、如在銷售領域采集則本地生產的樣品數量不少于80%。 　　3、采集的樣品應在保質期內，并考慮檢驗時樣品在保質期內。 　　4、樣品采集地點應考慮“添加劑”可能用在的重點環節，即該類食品添加劑可能出現的各個監管環節如食品原料、生產加工、銷售流通、餐飲等。 　　5、樣品的代表性還表現在樣品來源于大、中、小企業。因此在不同監管領域樣品采集時應考慮大中小三個層次（如大中小農場；大中小食品生產企業；大中小商場超市或集貿市場；大中小餐飲業等），每個層次至少采集10個樣品，少于10個樣品的，全部采集。 　　（三）依法進行樣品的采集和檢驗。包括采集程序、采集方法、封存、儲存、傳遞、檢驗等工作按照國家或地方各監管部門頒布的監督檢查規范、抽檢管理規定或辦法執行。 　　四、檢驗方法 　　檢驗項目按附件指定的檢驗方法和有關國家標準檢驗方法執行。 　　附件2 全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治國家專項抽檢工作方案 　　為加強對重點食品的抽檢工作，全國專項整治領導小組決定組織部分省份相關部門和檢驗機構開展國家專項抽檢工作，制定本工作方案。 　　一、職責分工 　　（一）全國專項整治領導小組辦公室負責監督抽檢方案的組織實施及結果匯總。 　　（二）各有關部門對國家專項抽檢工作進行督導檢查和指導。 　　（三）各地專項整治領導小組負責抽檢工作組織協調及結果上報。 　　（四）具體承擔抽檢任務的單位見附表1。 　　二．樣品采集要求 　　1. 樣品采集地點見附表1。 　　2. 樣品采集的要求。 　　（1）樣品采集原則為樣品應具有代表性。應采集不同生產廠家的樣品，達不到要求數量的，可以采集同一廠家但不同品牌的產品，仍達不到的可以選擇不同口味的產品。采樣地點覆蓋省市縣且不少于3家。水發水產品不少于5家。 　　（2）在銷售流通領域采集樣品，本地生產的樣品數量不少于80%。 　　（3）采集的樣品應在保質期內，并考慮檢驗時樣品在保質期內。 　　（4）樣品采集量：每個食品樣品應采集2份，每份至少500g。其中一份送檢驗機構用于檢驗，一份留存采樣機構用于復檢（檢驗有異議時）。水發水產品中甲醛檢驗不復檢，可以不留樣。 　　（5）樣品保存：原料奶散裝樣品應混勻后用滅菌容器分裝。水發產品用化學分析用容器分裝。取樣后在0-4℃條件下運輸，并于18h內送到試驗室,如果無冷藏條件應于采樣后4h內檢驗。樣品保存在-20℃條件。其他定型包裝產品按照樣品標簽標示條件進行保存。 　　（三）樣品傳遞：采樣機構應派專人于4月1日前將樣品送到指定的檢驗機構，并按照檢驗規定完成樣品的接收程序。 　　（四）依法進行樣品的采集和檢驗，包括采集程序、采集方法、封存、儲存、傳遞、檢驗等工作按照國家或地方各監管部門頒布的監督檢查規范、抽檢管理規定或辦法執行。 　　（五）全國專項整治領導小組提供抽檢經費。 　　三、結果報送和判定 　　（一）各地專項整治領導小組于2009年4月15日前將抽檢結果（不包括結果判定）報送全國專項整治領導小組辦公室。抽檢數據匯總表（格式）見附表2。 　　（二）結果判定 　　各地專項整治領導小組對于具有國家限量標準的檢驗結果進行判定，并對違法產品進行查處。 　　對于沒有國家限量標準的項目，由全國專項整治領導小組專家委員會對結果進行判定。 　　附表1：專項整治國家專項抽檢工作方案具體項目 http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohwsjdj/s3594/200903/39650.htm 　　附表2：抽檢信息匯總表（格式） http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohwsjdj/s3594/200903/39650.htm 　指定檢驗方法1. 　　離子色譜法測定牛奶中硫氰酸根 　　1 原理 　　液態奶樣品沉淀蛋白、去除脂肪后，用離子色譜分析，電導檢測器檢測，外標法定量。 　　2 實驗部分 　　2.1 試劑與材料 　　2.1.1 試驗用水均為超純水 　　2.1.2 乙腈（色譜純） 　　2.1.3 固相萃取小柱：OnGuard RP柱（2.5cc），或相當者（如C18），使用前依次用5 ml甲醇和10 ml水活化。 　　2.1.4 硫氰酸標準品：北京化工廠 　　2.1.5 硫氰酸標準儲備液 　　將硫氰酸標準品于80度烘箱內烘干2小時。準確稱取干燥后的硫氰化鉀1.6732g于1000ml容量瓶中，定容，混勻。即得1000ppm硫氰根標準儲備液。 　　2.1.6 硫氰酸標準中間液 　　取硫氰酸標準儲備溶液 1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10 mg/L。 　　2.1.7 硫氰酸標準使用液 　　移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL硫氰酸標準中間液，用水定容于10 mL容量瓶中，濃度分別為0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L。 　　2.2 儀器 　　2.2.1 離子色譜儀：配備淋洗液發生器和電導檢測器； 　　2.2.2 離心機：冷凍離心機。 　　2.3 樣品處理 取4mL液體奶樣品，加入5mL乙腈沉淀蛋白，取上清液稀釋10倍，過RP柱（或經冷凍離心機）去除脂肪后上機。 　　2.4 離子色譜參考條件 　　色譜柱：強親水性陰離子交換柱。IonPac AS16，4.0×250mm分析柱；IonPac AG16，4.0×50mm保護柱；或其他相當者。 　　流動相：KOH溶液，梯度淋洗。淋洗液由淋洗液在線發生器在線產生。 KOH梯度程序如下： 時間（min） KOH濃度（mmol） 　　　　　　　　　　0 45 　　　　　　　　　　　13 45 　　　　　　　　　　13.1 70 　　　　　　　　　　　18 70 　　　　　　　　　　18.1 45 　　　　　　　　　　　23 45 　　流速：1.0 mL/min； 　　抑制器：ASRS-300型抑制器，4mm； 　　抑制器抑制模式：外接水模式，抑制電流175mA； 　　柱溫：30℃； 　　進樣體積：100 μL。 　　3 結果計算 　　X= c*9*10/4 …………………………（1） 　　式中： 　　X——液態奶中硫氰酸的含量，單位為微克每毫升（μg/mL）； 　　c——由標準曲線得到試樣溶液中硫氰酸的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）； 　　9——液態奶的體積與乙腈體積之和，單位為毫升（mL）； 　　4——液態奶的體積，單位為毫升（mL）； 　　10——稀釋倍數； 　　計算結果保留兩位有效數字。 　　4 精密度 　　在重復性條件下，獲得的硫氰酸的兩次獨立測試結果的絕對差值不大于其算術平均值的5%。 　指定檢驗方法2. 　　食品中富馬酸二甲酯殘留量的測定 　　1 范圍 本方法規定了食品中富馬酸二甲酯殘留量的GC測定方法。 　　本方法適用于糧食、糕點、水果等食品中富馬酸二甲酯殘留量的測定。 　　本方法的檢測限（LOD）為：25mg/kg。 　　2 規范性引用文件 　　下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。 　　GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法。 　　3 原理 　　樣品中富馬酸二甲酯（DMF）經提取凈化后，用附氫火焰離子檢測器的氣相色譜儀進行分離測定，與標準系列比較定量。 　　4 試劑和材料 　 　　4.1除非另有說明，所有試劑均為分析純，水：GB/T 6682規定的一級水。 　　4.2氯仿。 　　4.3無水硫酸鈉。 　　4.4中性氧化鋁（層析用60-80目）。 　　4.5標準溶液貯備液：0.1g富馬酸二甲酯（含量99.9%），用少量氯仿溶解，轉移到100ml容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，該標準溶液含富馬酸二甲酯1mg/ml。 　　4.6標準溶液使用液：分別吸取標準溶液5、10、15、20、25、30ml于100ml容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，富馬酸二甲酯濃度分別為50、100、150、200、250、300ug/ml。 　　5 儀器與設備 　　5.1氣相色譜儀，附氫火焰離子檢測器。 　　5.2勻漿機。 　　5.3粉碎機。 　　6 分析步驟 　　6.1樣品制備。 　　6.1.1 糧食、糕點、及含水分少低脂類的固體食品。 稱取5.0g或10.0g粉碎樣品，置于250ml具塞三角燒瓶中，加30ml氯仿，振搖30min，用定性濾紙過濾，取10ml濾液，吹入氮氣使濃縮至1ml,備用。 　　6.1.2 含脂肪較多的樣品 　　稱取粉碎樣品10.0g，加中性氧化鋁5－10g（視脂肪多少而定），以下按6.1.1"加30ml氯仿…"起，依法操作。 　　6.1.3 水果類 　　將水果去皮，切成碎片，加等量蒸餾水于勻漿機中勻漿后，稱取20.0g勻漿液（相當于10g樣品），加氯仿30ml，振搖30min，用定性濾紙過濾于125ml分液漏斗中，待分層后，用無水硫酸鈉過濾，取濾液10ml，吹入氮氣濃縮至1ml，待測。 　　6.2 測定 　　6.2.1色譜參考條件 　　a）色譜柱： 玻璃柱（內徑3mm，長2m），內裝涂以2％OV-101和6％OV-210混合固定液的60－80目Chromosorb W.AW DMCS(HP); 　　b）氣流速度：氮氣50ml/min；空氣500ml/min;氫氣35ml/min；。 　　c）溫度：氣化室及檢測器200℃,柱溫155℃。. 　　d) 進樣量：1μL。 　　6.3.2 測定 　　注入1uL標準系列中各濃度標準使用液于氣相色譜儀中，測得不同濃度富馬酸二甲酯的峰高，以濃度為橫坐標，相應的峰高值為縱坐標，繪制標準曲線。同時注射一定體積樣品溶液，測得峰高與標準曲線比較定量。 　　6.2.3 陽性樣品的確證 　　按照上述條件測定試樣和標準工作溶液，如果試樣中的質量色譜峰保留時間與標準工作溶液一致（變化范圍在±2.5%之內） 　　條件許可可以通過GC—MS定性 　　6.2.4 空白實驗 　　除不稱取樣品外，均按上述測定條件和步驟進行。 　　6.2.5 允許差 　　在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的20%。 　　7. 結果計算 　　樣品中富馬酸二甲酯殘留量按照下式計算： 　　X：樣品中富馬酸二甲酯殘留量，mg/kg 　　A：測定樣品液中富馬酸二甲酯含量，ug/ml 　　V1：濃縮用樣品提取液體積，ml 　　V2：樣品氯仿提取液總體積，ml 　　V3：樣品濃縮后的體積，ml 　　V4：標準溶液進樣體積，ul 　　V5：樣品溶液進樣體積，ul 　　m：樣品重量，g 　　8. 相關技術參數 　　方法最低檢出限：25mg/kg。回收率在88.9％～94.2%范圍內，其相對標準偏差在4.32％～9.07％的范圍內。 　　指定檢驗方法3-1. 　　辣椒粉中堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性黃的測定 　　——液相色譜 　　1 原理 　　試樣中的目標化合物用乙腈-水（7－3）提取，用高效液相色譜C18柱分離，紫外檢測器檢測，外標法定量。 　　2 實驗部分 　　2.1 儀器與試劑 　　高效液相色譜儀，配備有Waters-Allains2695泵控及自動進樣系統，以及Waters-2996二極管陣列檢測器；離心機；超聲震蕩器。 　　甲醇（色譜純，迪馬公司） 　　乙腈（色譜純，迪馬公司） 　　試驗用水均為超純水 　　乙酸銨（分析純） 　　無水乙酸（分析純） 　　標準儲備液的配制：準確稱取0.0100g酸性黃、酸性橙Ⅱ、堿性橙、堿性玫瑰精標準品于10mL棕色容量瓶中，用甲醇醇溶解并定容至體積。 　　標準使用液：分別吸取1.0mL酸性黃、酸性橙Ⅱ、堿性橙、堿性玫瑰精的標準儲備液到10mL容量瓶中用水定容至刻度為中間使用液，再分別取0.1、0.5、1.0、2.0、5.0mL中間使用液到1mL容量瓶中用水定容至刻度，四種組分的標準系列為：1、5、10、20、50μg/mL. 　　提取液：乙腈/水=7/3 　　2.2 液相色譜參考條件 色譜柱：Inertsil ODS-3 4.6×250mm，5μm； 　　流動相：A:乙腈；B：10mM乙酸銨水溶液（乙酸0.12％） 　　梯度洗脫： A B 　　0min： 30 70 14min： 82 18 15min 82 18 16min 30 70 　　波長：酸性黃、酸性橙Ⅱ、堿性橙450nm；堿性玫瑰精550nm 　　流速：1.0mL/min；柱溫：35℃；進樣體積：20μL。 　　2.3 樣品處理 　　準確稱取2～5g樣品于50mL塑料離心管中，加入10mL提取液，超聲提取20min后，以1000轉/h離心10min，取20μL液相色譜測定。 　　3 結果計算 　　分別取標準和樣品各20μL進樣，HPLC測定，外標法定量。 　 　　C：樣品中待測組分的含量，μg/g； 　　c：樣品中待測組分的測定濃度，μg/mL； 　　W：樣品重量，g。 　　指定檢驗方法3-2. 　　辣椒粉中堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性黃的測定 　　——液相色譜-串聯質譜法 　　1 原理 　　試樣中的目標化合物用甲醇-乙酸銨溶液提取，經弱陰離子交換固相萃取柱凈化后，液相色譜-串聯質譜測定，基質加標工作曲線外標法定量。 　　2 試劑與材料 除另有規定外，所有試劑均為分析純，實驗用水為超純水。 　　2.1 甲醇：液相色譜純 　　2.2 乙酸銨 　　2.3 甲酸 　　2.4氨水 　　2.5 提取溶液：稱取3.9克乙酸銨用水溶解，加入10.0 mL 甲酸，用水定容到500 mL后，用甲醇定容到1000 mL。 　　2.6 固相萃取柱平衡溶液：稱取3.9克乙酸銨用水溶解，加10.0 mL甲酸，用水定容到500mL。 　　2.7 淋洗溶液：稱取3.9克乙酸銨用水溶解，加10.0 mL甲酸和25.0mL甲醇，用水定容到500mL。 　　2.8 洗脫溶液：取5mL氨水用甲醇定容至100mL。 　　2.9 樣品稀釋液：稱取0.39克乙酸銨用水溶解，加0.50 mL甲酸，用水定容到250mL后，用水定容到500mL。 　　2.10 流動相A：稱取0.39克乙酸銨用水溶解，加0.50 mL甲酸，用水定容到500mL。 　　2.11 流動相B：乙腈，液相色譜純。 　　2.12 弱陰離子交換固相萃取柱：WAX，60mg/3mL，使用前依次用3mL甲醇、3mL水以及3mL固相萃取柱平衡溶液（2.5）活化。 　　2.13 標準品：堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ和酸性黃 。 　　2.14 標準儲備液（1.0 mg/mL）：準確稱取0.0100克堿性橙、玫瑰精、酸性橙Ⅱ和酸性黃標準品，用50%甲醇水溶液定容至10.0mL。 　　2.15 標準系列：配制堿性橙、玫瑰精、酸性橙Ⅱ和酸性黃混合標準系列，堿性橙、酸性橙Ⅱ和酸性黃濃度為：0.4、0.8、2.0、3.2、4.0μg/mL；玫瑰精標濃度為：10.0、20.0、50.0、80.0、100.0 ng/mL。 　　3 儀器和設備 　　3.1 液相色譜-串聯質譜儀：配有電噴霧（ESI）離子源。 　　3.2 離心機。 　　3.3 超聲波水浴。 　　3.4 固相萃取裝置。 　　3.5 氮吹儀。 　　4 樣品及基質加標工作曲線的制備 　　4.1 樣品的制備 a）提取 稱取1.0克試樣于50mL離心管中，加入10.0mL提取溶液，超聲提取30分鐘，10 000 r/min 離心10分鐘，上清液轉移至另一50mL離心管中；殘渣中加入10.0mL提取溶液再次提取，合并兩次提取溶液。 　　b）凈化 　　取5.0mL樣品提取液，用固相萃取柱平衡溶液（2.5）稀釋定容至50.0mL，過已活化好的弱陰離子固相萃取柱，用2mL淋洗液、2mL水淋洗，5mL洗脫液洗脫，收集洗脫液，用氮氣吹至近干，用樣品稀釋液定容至1.0mL，過0.22μm濾膜后液相色譜-串聯質譜測定。 　　4.2 基質加標工作曲線的制備 稱取1.0克空白樣品基質于50mL離心管中， 稱取6份，分別加入標準系列溶液（2.15）100μL，按4.1進行操作，制備基質加標工作曲線，堿性橙、酸性橙Ⅱ和酸性黃濃度為：10.0、20.0、50.0、80.0、100.0 ng/mL；玫瑰精濃度為：0.25、0.5、1.25、2.0、2.5 ng/mL。 　　5 測定 　　5.1 液相色譜-串聯質譜參考條件 　　色譜柱：BHT 1.7μm×100mm 　　流動相：A: 含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸銨水溶液； B: 乙腈。 　　　梯度洗脫 　　Time 　Flow（mL/min） 　A（%） 　B（%） 　0 　0.3 　90 10 5 0.3 10 90 6 0.3 10 90 6.5 0.3 90 10 10 0.3 90 10 　　進樣量：5μL 。 　　柱溫：40℃ 。 　　離子源：堿性橙、堿性玫瑰精，電噴霧ESI，正離子；酸性橙Ⅱ、酸性黃，電噴霧ESI，負離子。 　　掃描方式：多反應監測MRM。 　　監測離子對： 　　組分 　錐孔電壓（v） 　碰撞能量（ev） 　　母離子（m/z） 　　子離子（m/z） 堿性橙 38 20 212.8 76.5、120.6 堿性玫瑰精 70 40 433.2 399.2、355.1 酸性橙Ⅱ 40 40 327.0 155.9、79.8 酸性黃 50 30 352 155.9、79.7 　　5.2 定性測定 　　各檢測目標化合物以保留時間和兩對離子的（特征離子對/定量離子對）所對應的LC-MS/MS色譜峰面積相對豐度進行定性。要求被測試樣中目標化合物的保留時間與標準溶液中目標化合物的保留時間一致（一致的條件是偏差小于20%），同時要求被測試樣中目標化合物的兩對離子對應LC-MS/MS色譜峰面積比與標準溶液中目標化合物的面積比一致，相對豐度>50%、20-50%、10-20%、