各省、自治區、直轄市獸醫（畜牧、農牧、農業）廳（局、辦）：

　　根據《獸藥管理條例》和《關于加強獸藥殘留檢測試劑（盒）管理的通知》（農辦醫[2005] 3號），我部組織制定了《獸藥殘留酶聯免疫試劑（盒）備案審查技術資料要求》和《獸藥殘留試劑（盒）備案參考評判標準》，現予發布，請各有關部門遵照執行。此前發布的獸藥殘留檢測試劑（盒）備案技術資料要求與本通知不符的，以本通知為準。

　　附件：1.獸藥殘留酶聯免疫試劑（盒）備案審查技術資料要求

　　　　　2.獸藥殘留酶聯免疫試劑（盒）備案參考評判標準

　　二〇〇五年六月二十三日

　　附件1：獸藥殘留酶聯免疫試劑盒備案審查技術資料要求

　　一、產品研制概況

　　（一）立項依據和國內外研制概況

　　（二）產品研制概況

　　1、主要材料制備方法概述

　　2、檢測方法的建立

　　3、樣品提取方法的研究情況

　　4、與理化方法的比較

　　如無理化方法則選用代表性進口試劑盒比較

　　（三）復核試驗報告

　　至少提供2個復核試驗單位的報告。

　　二、產品生產工藝

　　1、生產過程

　　2、工藝流程

　　三、產品質量標準

　　（一）質量標準

　　1、物理性狀描述

　　2、靈敏度

　　3、特異性

　　陰性和具有參考意義濃度的陽性樣品測定結果范圍。

　　4、精密度

　　選用標準曲線50%抑制濃度（IC50）附近濃度的標準溶液重復測定。

　　5、適用范圍

　　6、用法及結果判定

　　7、注意事項

　　8、貯藏條件和保質期

　　9、規格

　　（二）質量標準起草說明

　　質量標準各項制定的依據。

　　四、產品穩定性試驗

　　2~8℃放置，分別于0、1、2、3個月測定，以后可根據保存期，每隔3個月測定1次。

　　推薦進行37℃加速和凍融的穩定性試驗。

　　測定項目為0標準液的OD值、IC50、代表濃度的添加回收率，直到測定值

　　超過允許范圍為止。

　　五、使用說明書

　　1、試驗原理

　　2、使用范圍

　　3、交叉反應

　　4、使用單位需自備的設備及試劑

　　5、提供的材料與試劑

　　6、溶液的配制

　　7、樣品的前處理方法

　　8、檢測步驟

　　9、結果判定

　　10、檢測方法靈敏度、準確度、精密度

　　11、注意事項

　　12、貯藏條件和保存期

　　13、供應商名稱、地址

　　六、試劑盒的技術參數

　　1、標準曲線

　　2、檢測限和定量限

　　3、臨界值

　　4、精密度和準確度

　　5、交叉反應

　　附件2：

　　試劑盒備案參考評判標準

　　1、標準曲線

　　定量方法：標準曲線至少由5個濃度組成，測定次數不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。

　　定性方法：工作濃度范圍通過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來確定，每個濃度重復不少于5次，濃度與響應值之間應有一定的關系。

　　2、檢測限和定量限

　　檢測限：20份空白樣品測定均值加3倍標準差。

　　定量限：應大于標準曲線中最低濃度點。對于定量方法，應對該濃度樣品至少測定6次進行驗證，而不能通過外延法推斷。

　　3、臨界值（cut-off值）的確定

　　對于有最高殘留限量的藥物，檢測方法的臨界值為20份添加MRL濃度的樣品重復3次測定的均值減去1.64倍標準差，即95%置信限處。

　　對于禁用藥物，檢測方法的臨界值為定量限，該值應達到公認的指標。

　　4、精密度和準確度

　　對于有最高殘留限量的藥物，添加濃度為MRL及MRL上下各一個濃度；對于禁用藥物，添加濃度為定量限和2倍定量限，每個添加濃度至少測定5個平行樣，并至少進行3批實驗（不同檢測日期，不同標準曲線，不同批次試劑盒）。

　　（1）準確度：回收率范圍大于40%或符合相應檢測標準的要求。

　　（2）精密度：以變異系數表示。

　　批內變異系數：每批平行樣之間的變異系數小于或等于25%，對于禁用藥物小于或等于30%.

　　批間變異系數：所有樣品之間的變異系數值小于或等于30%，對于禁用藥物小于或等于40%.

　　定性方法：陰性和陽性樣品各測定不少于50份，確定假陽性率和假陰性率。

　　5、交叉反應

　　試劑盒與待檢藥物類似物、代謝物或共同存在的藥物測定交叉反應率。

　　6、保存期

　　保存期通過保存條件的穩定性試驗結果確定。

　　7、復核試驗

　　復核試驗主要內容應包括：

　　（1）定量方法：檢測限、IC50以及至少兩個添加濃度的準確度和精密度，并與理化方法（或與具代表性進口試劑盒）比較。

　　（2）定性方法：檢測限、假陽性率和假陰性率。